Môžu byť peptidové substráty označené? To je otázka, ktorú som často kladený ako dodávateľ peptidových substrátov. A odpoveď je výrazná áno! V tomto blogu sa ponorím do sveta označovania peptidových substrátov, prečo je to dôležité, ako sa to robí, a do rôznych aplikácií, ktoré má.
Po prvé, povedzme si o tom, prečo je značenie peptidových substrátov veľkým problémom. Označovanie nám umožňuje sledovať a detekovať tieto substráty v biologických systémoch. Je to ako dať na ne malú značku, aby sme videli, kam idú a čo robia. Je to veľmi užitočné v mnohých výskumných oblastiach, ako je objavovanie liekov, výskum rakoviny a neuroveda. Napríklad pri objavovaní liečiva nám značené peptidové substráty môžu pomôcť pochopiť, ako lieky interagujú so špecifickými enzýmami alebo proteínmi. Vidíme, či je liek záväzný na správny cieľ a ako efektívne to robí.
Teraz sa dostaneme k tomu, ako môžeme označiť peptidové substráty. Existuje niekoľko metód a každá z nich má svoje vlastné výhody a nevýhody. Jednou z bežných metód je fluorescenčné označovanie. Zahŕňa to pripevnenie fluorescenčnej molekuly k peptidovému substrátu. Keď je označený substrát vystavený špecifickej vlnovej dĺžke svetla, vyžaruje svetlo inej vlnovej dĺžky, ktorá sa dá detegovať pomocou fluorescenčného mikroskopu alebo podobného prístroja. Fluorescenčné označovanie je skvelé, pretože je vysoko citlivé a umožňuje skutočné zobrazovanie substrátu v živých bunkách.
Ďalšou metódou je rádioaktívne označovanie. Tu je rádioaktívny izotop začlenený do peptidového substrátu. Rádioaktívne štítky je možné detegovať pomocou detektora žiarenia. Táto metóda je tiež veľmi citlivá, ale má nejaké nevýhody. Rádioaktívne materiály sú nebezpečné a pri práci s nimi je potrebné prijať osobitné bezpečnostné opatrenia. Musí sa zvážiť aj polovičná životnosť rádioaktívneho izotopu, pretože obmedzuje časový rámec, v ktorom je možné použiť označený substrát.
Biotinylácia je ďalším spôsobom, ako označiť peptidové substráty. Biotín je malá molekula, ktorá má vysokú afinitu k streptavidínu alebo avidínu. Pripojením biotínu k peptidovému substrátu môžeme použiť detekčné systémy založené na streptavidíne alebo avidíne. Tieto systémy sa často používajú v enzýmových imunosorbentných testoch (ELISAS) a ďalších metódach detekcie proteínov.
V našej spoločnosti ponúkame širokú škálu peptidových substrátov, ktoré je možné označiť. Napríklad mámeInhibítor Calpain VI. Tento substrát je možné označiť pomocou metód, ktoré som spomenul vyššie. Je to skvelý nástroj na štúdium enzýmov Calpain, ktoré sa podieľajú na rôznych bunkových procesoch vrátane apoptózy a bunkovej signalizácie.
Z - lly - fmkje ďalším z našich populárnych peptidových substrátov. Môže byť tiež označený a často sa používa vo výskume súvisiacich s kaspázami, skupinou enzýmov, ktoré hrajú kľúčovú úlohu v apoptóze.
A potom je tuMU - Val - HPH - FMK. Tento substrát môže byť označený za štúdium proteáz a ich funkcií v rôznych biologických kontextoch.
Hovorme o aplikáciách označených peptidových substrátov. Vo výskume rakoviny sa môžu značené substráty použiť na štúdium aktivity proteáz, ktoré sú nadmerne exprimované v rakovinových bunkách. Pochopením toho, ako tieto proteázy fungujú, môžeme vyvinúť nové lieky, ktoré sa na ne zameriavajú. Napríklad, ak dokážeme označiť peptidový substrát, ktorý je špecificky štiepený proteázou súvisiacou s rakovinou, môžeme skrínovať lieky, ktoré inhibujú toto štiepenie, čo potenciálne vedie k novej liečbe rakoviny.
V neurovedy nám môžu značené peptidové substráty pomôcť pochopiť úlohu proteáz pri synaptickej plasticite a neurodegeneratívnych chorobách. Označením substrátov a sledovaním ich pohybu a štiepenia v neurónoch môžeme získať prehľad o molekulárnych mechanizmoch, ktoré sú základom týchto procesov.
Objavenie liečiva je ďalšou oblasťou, v ktorej žiaria značené peptidové substráty. Ako som už spomenul, môžu sa použiť na skríning potenciálnych kandidátov na drogy. Môžeme označiť substrát, ktorý súvisí so špecifickým cieľom ochorenia, a potom otestovať rôzne zlúčeniny, aby sme zistili, či ovplyvňujú aktivitu substrátu. To môže ušetriť veľa času a zdrojov v procese rozvoja liekov.
Pokiaľ ide o výber značeného peptidového substrátu, je potrebné zvážiť niekoľko vecí. Najprv musíte premýšľať o type detekčnej metódy, ktorú budete používať. Ak plánujete používať fluorescenčnú mikroskopiu, najlepšou voľbou môže byť fluorescenčne označený substrát. Ak robíte test založený na ELISA, môžu byť vhodnejšie biotinylované substráty.
Dôležitá je aj stabilita štítku. Niektoré štítky môžu byť za určitých podmienok stabilnejšie ako iné. Napríklad fluorescenčné štítky môžu byť citlivé na svetlo a kyslík, takže správne skladovanie a manipulácia sú rozhodujúce na udržanie svojej integrity.
Cena je ďalším faktorom. Niektoré metódy označovania môžu byť drahšie ako iné. Napríklad rádioaktívne označovanie vyžaduje špeciálne postupy vybavenia a manipulácie, ktoré môžu pridať náklady.
Záverom možno povedať, že peptidové substráty môžu byť určite označené a je to silný nástroj v biologickom výskume. Či už ste výskumný pracovník v laboratóriu alebo vedec v biotechnologickom priemysle, značené peptidové substráty vám môžu pomôcť odpovedať na dôležité otázky a robiť nové objavy.
Ak máte záujem o nákup substrátov s označenými peptidmi alebo diskutovať o vašich konkrétnych potrieb, radi by sme sa od vás dozvedeli. Stačí sa na nás osloviť a náš tím odborníkov vám rád pomôže pri hľadaní správnych peptidových substrátov pre váš výskum.
Odkazy
- Hermanson, GT (2013). Techniky biokonjugátu. Akademická tlač.
- Lottspeich, F., & Engels, JW (2006). Bioanalytics: Analytické metódy a koncepty v biochémii a molekulárnej biológii. Wiley - vch.