Ahoj! Ako dodávateľ katalógových peptidov sa ma často pýtajú, ako sú tieto peptidy formulované pre rôzne aplikácie. Je to super zaujímavá téma a rád sa s vami podelím o pár postrehov.
Najprv si povedzme, čo sú katalógové peptidy. Jednoducho povedané, sú to vopred pripravené peptidy, ktoré sú dostupné v katalógu dodávateľa. Tieto peptidy sa používajú v širokej škále aplikácií, od výskumu v biochémii a farmakológii až po potenciálne terapeutické využitie.
Základy formulácie
Formulácia katalógových peptidov začína jasným pochopením konečného použitia. Rôzne aplikácie vyžadujú, aby peptidy boli v špecifických formách. Napríklad, ak sa má peptid použiť v in vitro experimente s bunkovou kultúrou, musí byť vo forme, ktorá je ľahko rozpustná v médiu bunkovej kultúry. Na druhej strane, ak ide o štúdie in vivo na zvieratách, faktory ako stabilita vo fyziologickom prostredí tela a biologická dostupnosť sa stávajú rozhodujúcimi.
Prvým krokom pri formulovaní peptidu je jeho syntéza. Existujú rôzne metódy syntézy peptidov, ale najbežnejšou je syntéza peptidov na pevnej fáze (SPPS). V SPPS je peptidový reťazec zostavený po jednej aminokyseline na pevnom nosiči. Táto metóda umožňuje presnú kontrolu nad sekvenciou aminokyselín v peptide.
Akonáhle je peptid syntetizovaný, je potrebné ho vyčistiť. Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) je široko používaná technika na purifikáciu peptidov. Oddeľuje peptid od iných nečistôt na základe ich rôznych interakcií so stacionárnou fázou a mobilnou fázou. Po purifikácii sa čistota peptidu kontroluje pomocou techník, ako je hmotnostná spektrometria.
Formulácia pre výskumné aplikácie
Vo výskume sa katalógové peptidy používajú v rôznych testoch. Napríklad pri štúdiách väzby receptor-ligand sa peptidy často používajú ako ligandy na štúdium väzbovej afinity a špecifickosti receptorov. Na formuláciu peptidov pre tieto štúdie sa zvyčajne rozpúšťajú v tlmivom roztoku, ktorý napodobňuje fyziologické prostredie. To pomáha zaistiť, aby si peptid zachoval svoju prirodzenú konformáciu a mohol správne interagovať s receptorom.
Vezmime siEnterostatín (hovädzí, psí, prasací)ako príklad. Enterostatín je peptid, ktorý bol študovaný pre svoju úlohu pri regulácii príjmu potravy. Pri formulovaní enterostatínu na výskum regulácie príjmu potravy sa zvyčajne rozpúšťa vo fyziologickom roztoku. Tento pufor poskytuje stabilné prostredie pre peptid a je kompatibilný s in vitro a in vivo experimentmi.
Ďalšou bežnou výskumnou aplikáciou je štúdium interakcií proteín - proteín. Peptidy môžu byť navrhnuté tak, aby napodobňovali špecifické oblasti proteínov a použili sa na narušenie alebo zosilnenie týchto interakcií. Pre takéto štúdie musia byť peptidy formulované tak, aby mohli preniknúť do buniek, ak k interakcii dochádza vo vnútri bunky. V niektorých prípadoch sú peptidy konjugované s bunkami penetrujúcimi peptidmi (CPP), aby im pomohli prejsť cez bunkovú membránu.
Formulácia pre terapeutické aplikácie
Pokiaľ ide o terapeutické aplikácie, formulácia katalógových peptidov je ešte zložitejšia. Terapeutické peptidy musia byť v tele stabilné, musia mať dostatočne dlhý polčas rozpadu a musia byť schopné dosiahnuť svoje cieľové miesta.
Jednou z výziev pri formulovaní terapeutických peptidov je ich náchylnosť na degradáciu enzýmami v tele. Na prekonanie tohto problému sa používajú rôzne stratégie. Napríklad, peptidy môžu byť modifikované pridaním chemických skupín, ktoré ich chránia pred enzymatickou degradáciou. Ďalším prístupom je zapuzdrenie peptidov do nanočastíc alebo lipozómov. Tieto nosiče môžu chrániť peptid pred degradáciou a tiež zlepšiť jeho biologickú dostupnosť.
Beta - amyloid (1 - 42), ľudskýje peptid, ktorý je spojený s Alzheimerovou chorobou. V kontexte vývoja potenciálnych terapií Alzheimerovej choroby je rozhodujúce formulovanie beta-amyloidu (1 - 42) tak, aby sa dal použiť na štúdium mechanizmu ochorenia alebo ako cieľ pre vývoj liekov. Môže byť formulovaný vo formulácii s pomalým uvoľňovaním, ako je depot na báze polyméru, aby sa zabezpečilo nepretržité zásobovanie peptidom počas dlhého obdobia.
Formulácia pre diagnostické aplikácie
V diagnostických aplikáciách sa peptidy používajú ako biomarkery alebo ako sondy na detekciu špecifických molekúl. Napríklad môžu byť peptidy navrhnuté tak, aby sa viazali na špecifické protilátky alebo antigény. Pri formulovaní peptidov na diagnostiku musia byť vo forme, ktorá je kompatibilná s diagnostickým testom.
Pre imunotesty sú peptidy často konjugované so značkami, ako sú fluorescenčné farbivá alebo enzýmy. Tieto značky umožňujú ľahkú detekciu interakcie peptid - cieľ. Konjugát peptid-značka sa potom formuluje v pufri, ktorý je vhodný na imunotest, zvyčajne v pufri, ktorý minimalizuje nešpecifickú väzbu.
Proteínkináza C (19 - 36)sa môže použiť ako diagnostický marker pre určité ochorenia súvisiace s abnormálnou aktivitou proteínkinázy C. Pri formulovaní tohto peptidu na diagnostické použitie môže byť konjugovaný s fluorescenčnou značkou a formulovaný v pufri, ktorý je optimalizovaný pre špecifický imunotest, ktorý sa používa.
Kontrola kvality vo formulácii peptidov
Kontrola kvality je nevyhnutnou súčasťou formulácie peptidov. Pre každú šaržu katalógových peptidov sú zavedené prísne opatrenia na kontrolu kvality. To zahŕňa kontrolu čistoty, identity a stability peptidov.
Čistota sa zvyčajne stanovuje pomocou HPLC a hmotnostnej spektrometrie. Identita peptidu sa potvrdí porovnaním jeho hmotnosti a sekvencie s očakávanými hodnotami. Testovanie stability je tiež dôležité, najmä pre peptidy, ktoré budú dlhodobo skladované alebo používané v dlhodobých experimentoch. Peptidy sa testujú pri rôznych podmienkach skladovania (napr. pri rôznych teplotách a hodnotách pH), aby sa zabezpečilo, že zostanú stabilné.
Vlastná formulácia
V našej spoločnosti ponúkame aj služby formulácie na mieru. Ak máte na mysli konkrétnu aplikáciu a potrebujete, aby bol peptid formulovaný konkrétnym spôsobom, môžeme s vami spolupracovať na vývoji vlastnej formulácie. To by mohlo zahŕňať úpravu zloženia pufra, pridanie špecifických aditív alebo použitie konkrétneho dodávacieho systému.
Či už ste výskumník, ktorý hľadá peptid pre svoj ďalší experiment, farmaceutická spoločnosť vyvíjajúca novú terapiu alebo diagnostická spoločnosť, ktorá potrebuje peptidový biomarker, máme odborné znalosti na vytvorenie správneho peptidu pre vašu aplikáciu.
Ak máte záujem dozvedieť sa viac o našich katalógových peptidoch alebo o našich službách na mieru, neváhajte nás kontaktovať. Vždy sa radi porozprávame a prediskutujeme, ako môžeme splniť vaše potreby týkajúce sa peptidov.
Referencie
- Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., & Walter, P. (2002). Molekulárna biológia bunky. Garland Science.
- Goodman, M. a Felix, AM (2003). Syntéza peptidov a peptidomimetik. Methods in Enzymology, 369, 1 - 21.
- Langer, R., & Tirrell, DA (2004). Navrhovanie materiálov pre biológiu a medicínu. Nature, 428 (6982), 487 - 492.