Ahoj! Ako dodávateľ TRAP - 14 sa ma často pýtajú, ako sa tento peptid syntetizuje. Tak som si myslel, že si nájdem čas a rozoberiem vám proces syntézy.
Pochopenie TRAP - 14
Najprv si v krátkosti povedzme, čo je TRAP - 14. TRAP je skratka pre trombínový receptor aktivujúci peptid. TRAP - 14 je špecifický peptid s reťazcom 14 aminokyselín. Zohráva kľúčovú úlohu pri aktivácii trombínových receptorov, ktoré sú dôležité v procese zrážania krvi a iných fyziologických funkciách.
Proces syntézy
Krok 1: Výber aminokyselín
Syntéza TRAP - 14 začína starostlivým výberom správnych aminokyselín. Musíme si vybrať vysoko kvalitné aminokyseliny, ktoré sú čisté a bez akýchkoľvek kontaminantov. Každá aminokyselina má svoje vlastné jedinečné vlastnosti a získanie tých správnych je kľúčom k syntéze funkčného peptidu TRAP - 14. Napríklad sa musíme uistiť, že ochranné skupiny postranných reťazcov aminokyselín sú vhodné pre metódu syntézy, ktorú budeme používať.
Krok 2: Syntéza peptidov v pevnej fáze (SPPS)
Väčšinu času používame syntézu peptidov na pevnej fáze na výrobu TRAP - 14. Túto metódu vyvinul Robert Bruce Merrifield v roku 1963 a v syntéze peptidov to bola zásadná zmena.
Proces začína pripojením prvej aminokyseliny na pevný nosič, zvyčajne živicu. Živica poskytuje stabilný základ pre rastúci peptidový reťazec. Akonáhle je pripojená prvá aminokyselina, môžeme začať pridávať zvyšné aminokyseliny jednu po druhej.
Pred pridaním každej novej aminokyseliny ju musíme aktivovať. To zahŕňa reakciu s kopulačným činidlom. Spojovacie činidlo pomáha vytvárať peptidovú väzbu medzi novou aminokyselinou a rastúcim peptidovým reťazcom na živici. Po kopulačnej reakcii musíme zmyť všetky nezreagované činidlá a vedľajšie produkty.
Jednou zo skvelých vecí na SPPS je, že sa dá relatívne ľahko automatizovať. Na riadenie pridávania aminokyselín, aktivačných krokov a premývacích krokov môžeme použiť syntetizátory peptidov. To nielen urýchľuje proces syntézy, ale tiež znižuje riziko ľudskej chyby.
Krok 3: Deprotekcia
Po pridaní všetkých aminokyselín, aby sa vytvoril 14-aminokyselinový reťazec TRAP-14, musíme odstrániť ochranné skupiny. Tieto ochranné skupiny boli pridané skôr, aby sa zabránilo nežiaducim reakciám počas procesu syntézy.
Deprotekcia sa zvyčajne vykonáva použitím silnej kyseliny, ako je kyselina trifluóroctová (TFA). TFA môže prerušiť väzby medzi ochrannými skupinami a aminokyselinami bez poškodenia peptidového reťazca. Musíme však byť opatrní s reakčnými podmienkami, ako je koncentrácia TFA a reakčný čas, aby sme sa vyhli akýmkoľvek vedľajším reakciám.
Krok 4: Odštiepenie od živice
Akonáhle je deprotekcia dokončená, musíme odštiepiť TRAP-14 peptid zo živice. To sa tiež robí s použitím vhodného štiepiaceho činidla. Po odštiepení sa peptid uvoľní do roztoku a živica sa môže odstrániť filtráciou.
Krok 5: Purifikácia
Surový TRAP-14 peptid získaný po štiepení je potrebné vyčistiť. Existuje niekoľko metód čistenia, ktoré môžeme použiť, ale jednou z najbežnejších je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC).
HPLC oddeľuje peptid od akýchkoľvek zostávajúcich nečistôt na základe ich rôznych chemických vlastností. Mobilnú fázu a stacionárnu fázu HPLC kolóny vieme upraviť tak, aby sa dosiahla najlepšia separácia. Po prečistení môžeme získať vysoko čistý peptid TRAP - 14.
Krok 6: Charakterizácia
Nakoniec musíme charakterizovať syntetizovaný peptid TRAP - 14, aby sme sa uistili, že má správnu štruktúru a vlastnosti. Na stanovenie molekulovej hmotnosti peptidu používame techniky, ako je hmotnostná spektrometria. Ak sa molekulová hmotnosť zhoduje s očakávanou hodnotou, je to dobrý znak toho, že syntéza bola úspešná. Na potvrdenie sekvencie aminokyselín a trojrozmernej štruktúry peptidu môžeme použiť aj nukleárnu magnetickú rezonančnú spektroskopiu (NMR).
Porovnanie s inými peptidmi
Je zaujímavé porovnať proces syntézy TRAP - 14 s inými peptidmi. napr.PASCA - 5je ďalší peptid aktivujúci trombínový receptor, ale má len 5 aminokyselín. Syntéza TRAP - 5 je vo všeobecnosti rýchlejšia a jednoduchšia, pretože je potrebné pridať menej aminokyselín. Základné princípy SPPS však stále platia.
Ďalší peptid,DOTA – E – [c(RGDfK)2], má zložitejšiu štruktúru. Obsahuje cyklický peptid a chelatačné činidlo (DOTA). Syntéza tohto peptidu vyžaduje ďalšie kroky na vytvorenie cyklickej štruktúry a pripojenie skupiny DOTA.
Secretin (potkan)je peptidový hormón. Jeho syntéza sa tiež riadi všeobecnými princípmi syntézy peptidov, ale sekvencia a požiadavky na biologickú aktivitu môžu viesť k určitým rozdielom v podmienkach syntézy a metódach čistenia.
Prečo si vybrať našu TRAP - 14
Ako dodávateľ sme hrdí na náš vysoko kvalitný TRAP - 14. Máme prísne opatrenia na kontrolu kvality v každom kroku procesu syntézy. Náš tím odborníkov má dlhoročné skúsenosti so syntézou peptidov, takže si môžete byť istí, že TRAP - 14, ktorý od nás dostanete, je čistý a funkčný.
Ponúkame tiež služby syntézy na mieru. Ak potrebujete upravenú verziu TRAP - 14 alebo peptid so špecifickou sekvenciou, vieme s vami spolupracovať, aby sme splnili vaše požiadavky.
Kontaktujte nás ohľadom nákupu
Ak máte záujem o kúpu TRAP - 14 alebo máte akékoľvek otázky týkajúce sa našich produktov, neváhajte nás kontaktovať. Vždy vám radi pomôžeme s vašimi potrebami v oblasti peptidov. Či už ste výskumník v laboratóriu alebo spoločnosť pracujúca na vývoji nových liekov, môžeme vám poskytnúť vysoko kvalitný TRAP - 14, ktorý potrebujete.
Referencie
- Merrifield, RB (1963). Syntéza peptidov na pevnej fáze. I. Syntéza tetrapeptidu. Journal of the American Chemical Society, 85(14), 2149 - 2154.
- Fields, GB, & Noble, RL (1990). Syntéza peptidov na pevnej fáze využívajúca 9-fluórenylmetoxykarbonylaminokyseliny. International Journal of Peptide and Protein Research, 35(2), 161 - 214.