Hybridoma Fusion And Selection Medium (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基（HAT）

产品信息 Popis produktu

产品名称

Názov produktu

杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

Hybridómové fúzne a selekčné médium (HAT)

货号 Kat.č

BRS-MED01

规格

Špecifikácia

500 ml/cca

500 ml / fľaša

产品组分

Komponenty

DMEM 基础培养基:80 % (体积比)

DMEM základné médium: 80 % (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Importované fetálne bovinné sérum (FBS): 10 % (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Kondicionované médium: 10 % (v/v)

青霉素:100 单位/ml

Penicilín: 100 U/ml

链霉素: 100 单位/ml

Streptomycín: 100 U/ml

次黄嘌呤 (hypoxantín): 100 uM

Hypoxantín: 100 uM

胸腺嘧啶核苷 (tymidín): 16 uM

tymidín: 16 uM

氨基蝶呤 (aminopterín): 0,4 uM

Aminopterín: 0,4 uM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Ďalšie doplnkové látky: Rôzne cytokíny (dostatočné množstvo) a doplnky

保存条件

Podmienky skladovania

-20 stupňov 保存, 有效期 18 个月.

Skladujte pri -20 stupňoch. Trvanlivosť: 18 mesiacov.

使用方法

Návod na použitie

培养基融化:

37 stupňov 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5min使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Rozmrazovanie média:

Rozmrazte médium vo vodnom kúpeli s teplotou 37 stupňov. Utrite vonkajší povrch 70% etanolom a umiestnite ho do biologickej bezpečnostnej skrinky na použitie.
Poznámka: Vzhľad malého množstva bieleho vločkovitého materiálu po rozmrazení je normálny. Nechajte médium odstáť 3–5 minút, aby sa vločky usadili na dne, potom opatrne odoberte supernatant na použitie.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul/孔)7 绿孮6 孔) stupeň 5 % CO2 培养箱静置培养.

Bunková fúzia a očkovanie:

Vykonajte fúziu buniek pomocou fyzikálnych (elektrofúznych) alebo chemických (konvenčných PEG) metód. Resuspendujte fúzované bunky priamo v tomto médiu vo vhodnej hustote a objeme:

Elektrofúzia: 1 x 104 – 2 x 104 buniek/jamka

PEG fúzia: 5 x 104 – 1 x 105 buniek/jamku
Odporúčaný objem: 200 µl/jamka v 96-jamkovej platni.
Na kultiváciu inkubujte pri 37 stupňoch, 5 % CO₂.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Stredná náhrada:

Na 4. až 8. deň po-fúzii vykonajte čiastočnú alebo úplnú výmenu média podľa stavu rastu buniek.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Skríning klonov:

Keď bunkové klony v jamkách dosiahnu vhodnú veľkosť, vykonajte pozitívny klonový skríning.

注意事项

Prevencia

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Tento produkt je toxický a je určený len na selekciu a kultiváciu hybridómových buniek. Nesmie sa používať na kultiváciu živých zvierat, diagnostické účely alebo terapeutické aplikácie.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0).

Tento produkt je vhodný na selekciu a kultiváciu hybridómových buniek pomocou selekčného systému HGPRT. Neplatí pre TK alebo iné systémy výberu. Toto médium nemožno použiť na priamu kultiváciu buniek s deficitom HGPRT- (napr. NS1, SP2/0).

本产品为无菌溶液,pH 为 7,2~7,4,取用需在无菌条件下进行.

Tento produkt je sterilný roztok s pH 7,2–7,4. Všetky manipulácie sa musia vykonávať za aseptických podmienok.