Peptidová nukleová kyselina (PNA) je umelá molekula nukleovej kyseliny, ktorá má rôzne výhody oproti prirodzenej DNA a RNA, ako je vysoká selektivita, silná afinita a stabilita. Syntéza na pevnej fáze je jednou z hlavných metód syntézy PNA s nasledujúcimi špecifickými krokmi:
Výber vhodných ochranných skupín: Reakcia ochranných skupín s aminoskupinami alebo karboxylovými skupinami na prekurzore PNA za vzniku esterov alebo amidov ochranných skupín.
Pripojenie k polymérnej živici: Prekurzor PNA modifikovaný ochrannou skupinou je pripojený k polymérnej živici, typicky pomocou polymérnej živice s dĺžkou uhlíkového reťazca 20-30 aminokyselinových zvyškov.
Opakovanie cyklu syntézy: vrátane odstránenia N-koncovej ochrannej skupiny; Pridajte ďalšiu aminokyselinovú jednotku; Znova vykonajte ochranu N-svoriek.
Deprotekcia a separácia: Po syntéze sa peptidový reťazec PNA oddelí od polymérnej živice alkalickým spracovaním alebo kyslou hydrolýzou a všetky ochranné skupiny sa odstránia, čím sa získa produkt PNA.
Táto metóda dokáže efektívne syntetizovať molekuly PNA až do dĺžky niekoľkých stoviek nukleotidov a syntetizované produkty majú vysokú čistotu, vďaka čomu sú vhodné na výrobu vo veľkom meradle.
V praktických aplikáciách však čistota PNA agregovaná všeobecnými automatickými syntetizátormi nie je ideálna Výskumný ústav HiPep vyvinul novú syntetickú metódu, ktorá môže poskytnúť produkty PNA s vysokou čistotou. Táto metóda rieši niektoré problémy tradičnej syntézy, ako sú drahé ceny komponentov, ľahká stérická zábrana ochranných skupín a významný vplyv čistoty monoméru na biologickú aktivitu cieľovej PNA. Štandardný rozsah syntézy je 10-15 báz a pre syntézu z viac ako 16 základní ide o špeciálnu objednávku, ktorá si vyžaduje samostatný kontakt s dodávateľom
Okrem toho syntéza PNA zahŕňa aj rôzne modifikačné metódy, ako je fluorescenčná modifikácia, biotínová modifikácia, peptidová modifikácia, glykozylácia a modifikácia DNA, aby sa splnili rôzne výskumné potreby. Preto je veľmi dôležité zvoliť vhodné syntetické metódy a techniky založené na špecifickej aplikácii. scenáre a požiadavky.
