Hybridómové médium na expanziu a subklonovanie buniek 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 Popis produktu

产品名称

Názov produktu

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Hybridómová bunková expanzia a subklonovacie médium

货号 Kat.č

BRS-MED02

规格

Špecifikácia

500 ml/cca

500 ml/fľaša

产品组分

Komponenty

DMEM基础培养基:80 % (体积比)

DMEM základné médium: 80 % (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Fetálne bovinné sérum (FBS, importované): 10 % (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Kondicionované médium: 10 % (v/v)

青霉素:100 单位/ml

Penicilín: 100 U/ml

链霉素: 100 单位/ml

Streptomycín: 100 U/ml

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Iné aditíva: Faktory proliferácie jednotlivých buniek{0} a doplnky s malými molekulami

保存条件

Podmienky skladovania

-20 stupňov 保存, 有效期 18 个月.

Skladujte pri -20 stupňoch, trvanlivosť 18 mesiacov

使用方法

Návod na použitie

培养基融化:

37 stupňov 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Rozmrazovanie média:

Rozmrazte médium vo vodnom kúpeli s teplotou 37 stupňov. Vonkajší povrch utrite 70 % etanolom a umiestnite ho do biologickej bezpečnostnej skrinky.
Poznámka: Vzhľad malého množstva bieleho vločkovitého materiálu po rozmrazení je normálny. Nechajte médium odstáť 3–5 minút, aby sa vločky usadili, potom odoberte supernatant na použitie.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0,8-1,5 bunky/孔/200ul培养基铺数后按

Manipulácia s Fusion Wells – zdravé bunky:

V prípade fúznych jamiek s bunkami v dobrom stave (napr. farba média normálna alebo mierne žltá, bunky pod mikroskopom vyzerajú zdravé, svetlé a majú normálnu veľkosť), jemne pipetujte nahor a nadol žltou špičkou pipety. Spočítajte bunky a platňu pri 0,8–1,5 buniek/jamku v 200 ul média.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Manipulácia s fúznymi jamkami – suboptimálne bunky:

Pre fúzne jamky s bunkami v suboptimálnom stave (napr. stredne okyslené/žlté alebo bunky vyzerajú pod mikroskopom scvrknuté, tmavé) sú dostupné dve možnosti pre následné subklonovanie:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1,5 bunky/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Možnosť 1: Preneste bunky z fúznej jamky do 24-jamkovej platne obsahujúcej 1 ml tohto média. Po 2–3 dňoch expanzie spočítajte bunky a vykonajte subklonovanie pri 0,8–1,5 buniek/jamka v 200 µl média. V tomto štádiu je zdvojenie buniek obmedzené, ale stav buniek je dobrý, takže je ideálny na subklonovanie.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培养度5%% CO2静置培养3-4小时,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0,8-1,5 bunky/孔/200ul培养基);

Opatrne odstráňte supernatant z fúznej jamky pomocou žltej špičky pipety a pridajte 200 µl čerstvého média na jamku. Inkubujte pri teplote 37 stupňov, 5 % CO₂ počas 3-4 hodín. Potom odoberte vzorky buniek, spočítajte a vykonajte subklonovanie pri 0,8–1,5 buniek/jamka v 200 µl média.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Poznámka: Subklony kultivované pomocou média na expanziu a subklonovanie hybridných buniek zvyčajne dosiahnu štádium vhodného na následné skríning alebo analýzu v dňoch 6 až 8 po- subklonovaní.